Waters液相色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關(guān)系外,主要的是與日常的維護(hù)密切相關(guān)。為延長色譜柱的使用壽命,維護(hù)您的利益,請仔細(xì)閱讀此部分。
色譜柱的使用壽命主要是分為柱效和柱壓兩個指標(biāo)來衡量,如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束。因此,延長色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。
Waters液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。所以在選擇色譜柱之前,多了解一下自己的樣品和雜質(zhì),它們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量等。
1、樣品是極性和弱酸性的;C18可選擇在100%酸性水溶液條件下進(jìn)行檢測,即選擇一種能承載100%純水并能很好保留極性化合物的色譜柱。
2、如果樣品的極性太強(qiáng)或酸度太強(qiáng);可以選擇CN、NH2或硅膠柱、HILIC(親水色譜),也可以使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,需要相對精確的流動相ph值,否則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗掉,基本上離子對色譜柱不能用于其他實驗)
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1。0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0。2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1。0ml/min流速沖洗60min,再用該過渡流動相以1。0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。